Новый аденовирус у летучих мышей, Германия

  1. Аннотация
  2. Учеба
  3. Таблица 1
  4. Таблица 2
  5. Выводы
  6. Подтверждения
  7. биография
  8. Сноски
  9. Рекомендации

Emerg Infect Dis. 2009 дек; 15 (12): 2052–2055.

Институт Роберта Коха, Берлин, Германия (М. Соннтаг, А. Курт)

Институт исследований зоопарка и дикой природы им. Лейбница, Берлин (К. Мюльдорфер, С. Спек. Г. Виббелт)

Адрес для переписки: Андреас Курт, Центр биологической безопасности 1, Институт Роберта Коха, Берлин, Германия; Эл. адрес: [email protected] Эта статья была цитируется другие статьи в PMC.

Аннотация

Мы проверили 55 умерших летучих мышей vespertilionid 12 видов из южной Германии на вирусные инфекции. Новый аденовирус был выделен из образцов ткани 2 летучих мышей Pipistrellus pipistrellus , который представляет собой единственный изолят вируса хироптеран, найденный в Европе, кроме лиссавируса (вирус бешенства). Были найдены доказательства передачи аденовируса между летучими мышами.

Ключевые слова: выделение вируса, летучая мышь-веспертилонид, аденовирус, VIDISCA PCR, Pipistrellus pipistrellus, универсальная ПЦР, мастаденовирус, передача вируса, Chiroptera, вирусы, отправка

После недавних открытий вируса Эбола, генипавируса и тяжелых коронавирусных инфекций, связанных с острым респираторным синдромом, интерес к роли летучих мышей как хозяев для патогенов заметно возрос ( 1 ). За исключением всемирных исследований летучих мышей ( 2 ), большинство вирусологических исследований на летучих мышах ограничивалось определенным зоонозным агентом, вовлеченным в географически локализованную вспышку заболевания ( 3 - 5 ). В остальных исследованиях были обнаружены различные с медицинской точки зрения менее важные вирусы у летучих мышей в Америке, Африке, Азии и Австралии ( 1 , 6 ). В результате активизации исследовательских работ, касающихся летучих мышей и инфекционных заболеваний в Европе, недавно были обнаружены 2 новые группы вирусов, а именно бета- и гамма-герпесвирусы в тканях органов ( 7 ) и коронавирусы I группы в кале европейских летучих мышей 8 ). Однако, поскольку все виды летучих мышей в Европе / Германии защищены строгими правилами, получение подходящих образцов для выделения вируса является довольно сложной задачей по сравнению с большинством других частей мира.

Учеба

Мы провели обширный поиск неизвестных вирусов у 55 немецких летучих мышей с вестерлионидом, основанный как на общих анализах ПЦР, так и на методах выделения вируса, в рамках более широкого исследования, посвященного изучению гистопатологических изменений у немецких летучих мышей в связи с инфекционными патогенами. Умершие или умирающие летучие мыши из 12 видов ( Barbastella barbastellus, Eptesicus nilssoni, E. serotinus, Myotis daubentonii, M. mystacinus, Nyctalus leisleri, N. noctula, Pipistrellus kuhli, P. nathusii, P. pipistrellur aurusususurusus, Plecotusus), Plecotusus и Plecootus ) были собраны в сертифицированных центрах реабилитации летучих мышей на юге Германии и были исследованы макроскопически, бактериологически и гистологически.

Для вирусологического исследования гомогенизированную ткань органа инокулировали на клетки VeroE6 / 7 и ежедневно проверяли на цитопатические эффекты. Оставшийся материал ткани использовали для выделения РНК / ДНК и дальнейшего молекулярного анализа с помощью общих анализов ПЦР для выявления членов нескольких семейств вирусов, включая флавивирусы, хантавирусы, коронавирусы, ортомиксовирусы и парамиксовирусы. Виды летучих мышей определяли путем амплификации и секвенирования гена цитохрома B ( cytB ), стандартного метода идентификации видов ( 9 ).

Из протестированных образцов от 55 летучих мышей вирус был первоначально обнаружен только у 2 взрослых распространенных пипистреллов ( P. pipistrellus , №№ 198/07 и 199/07). Цитопатический эффект был обнаружен в клетках Vero E6 / 7 после второго пассажа, что указывает на присутствие вируса в клеточной культуре. Очищенный супернатант этих клеточных культур подвергали электронной микроскопии с отрицательным окрашиванием, которая показала многочисленные аденовирусоподобные частицы (панель A). Семейство Adenoviridae было подтверждено первой реакцией общей аденовирусной специфической вложенной ПЦР ( 10 ). Полученная последовательность фрагмента гена ДНК-полимеразы (≈550 п.н.) указывает на то, что вирусы были новым типом вируса в пределах рода Mastadenovirus и предварительно были названы штаммом летучей мыши-аденовируса 2 (летучая мышь AdV-2) P. pipistrellus virus 1 (PPV1). ).

)

А) Электронная микрофотография аденовирусных частиц, выделенных из Pipistrellus pipistrellus bat 199/07, Германия. Отрицательно окрашивается 1% уранилацетатом. Частицы вируса имели диаметр 70–90 нм икосаэдрической формы. Масштабная линейка = 100 нм. Б) Схематическое изображение геномных фрагментов, полученных из аденовируса летучей мыши 2 (номер доступа в GenBank. {"type": "entrez-nucleotide", "attrs": {"text": "FJ983127", "term_id": "269979836", "term_text": "FJ983127"}} FJ983127 ) в соответствии со штаммом собачьего аденовируса 2 Toronto A26 / 61 (регистрационный номер GenBank. {"type": "entrez-nucleotide", "attrs": {"text": "U77082", "term_id": "1732265", "term_text": "U77082"}} U77082 ). Геномные фрагменты были получены с помощью общей аденовирус-специфической ПЦР ( 10 ) и обнаружение вируса на основе метода ПЦР полиморфизма длин амплифицированных кДНК фрагментов ( 11 ). Частичная последовательность гена ДНК-полимеразы была получена из продукта ПЦР LongRange. Очищенные ПЦР-продукты непосредственно секвенировали с использованием готового набора реакционных средств BigDye Terminator Cycle Sequencing (Applied Biosystems, Foster City, CA, USA) и анализировали на автоматическом секвенаторе ABI 3770 (Applied Biosytems). С, клон; P, вложенный продукт ПЦР ≈550 п.н.

Для получения дополнительной информации о последовательности летучей мыши AdV-2, методом случайной ПЦР (обнаружение вируса на основе полиморфизма длин амплифицированных кДНК фрагментов) ( 11 ), который показал> 20 аденовирусных последовательностей, распределенных по геному (панель В). Неполная последовательность ДНК-полимеразы летучей мыши AdV-2 (3408 п.н .; номер доступа GenBank. {"type": "entrez-nucleotide", "attrs": {"text": "FJ983127", "term_id": "269979836", "term_text": "FJ983127"}} FJ983127 ) был получен после LongRange PCR с использованием Expand Long Range dNTPack (Roche, Mannheim, Germany) в соответствии с указаниями производителя и следующими 2 праймерами: ABS F1-B (5'-AAAAgAggCAAAgCAAgACAgTgg-3 ') и ABS R2-B ( 5'-ggCgggCAACAAAgACCTCA-3 '). После повторного анализа последовательности гена частичной ДНК-полимеразы для проверки мы обнаружили, что идентичность летучей мыши AdV-2 PPV1 с близкородственными аденовирусами варьировала от 68% до 74% на уровне нуклеиновой кислоты (), при этом была обнаружена наиболее близкая связь с аденовирусами собак. 1 и 2. До настоящего времени единственный другой аденовирус у летучих мышей был случайно выделен из первичных клеток почки летучей мыши здоровой летучей лисицы Рюкю ( Pteropus dasymallus yayeyamae ) ( 12 ), который, как оказалось, имеет довольно отдаленное филогенетическое отношение к летучей мыши AdV-2 ().

Таблица 1

Идентичность последовательностей (%) частичного гена ДНК-полимеразы (3408 п.н.) между летучей мышью AdV-2 и выбранными аденовирусами, Германия *

Вирус Собачий AdV-2 Собачий AdV-1 Свинина AdV-5 Человек AdV-26 Симьян AdV-7 Бычий AdV-2 Древесная стропила AdV-1 Летучая мышь AdV-2 PPV1 74 72 70 69 69 68 68 Вирус Собачий AdV-2 Собачий AdV-1 Свинина AdV-5 Человек AdV-26 Симьян AdV-7 Бычий AdV-2 Древесная стропила AdV-1 Летучая мышь AdV-2 PPV1 74 72 70 69 69 68 68

Филогенетическое дерево, построенное с использованием множественного выравнивания ампликонов ≈550 п.н., состоящего из частичного гена ДНК-полимеразы нового штамма летучей мыши-аденовируса 2 Pipistrellus pipistrellus virus 1 ( жирным шрифтом ; номер доступа в GenBank №. {"type": "entrez-nucleotide", "attrs": {"text": "FJ983127", "term_id": "269979836", "term_text": "FJ983127"}} FJ983127 ) и избранных членов семьи Adenoviridae , Германия. Выравнивание было проанализировано с помощью метода соединения соседей и модели p-расстояния в MEGA4 ( www.megasoftware.net ). Значения начальной загрузки (1000 повторов)> 35% указаны в узлах ветвления. Длина ветви пропорциональна эволюционному расстоянию (масштабная линейка). Аденовирусные роды указаны.

На основе вновь полученной информации о последовательности мы разработали специальную ПЦР TaqMan в реальном времени для обнаружения летучих мышей AdV-2 (ABS вперед 5′-CACAAgTggTgTCTTTgAgAgCA-3 ′, ABS обратный 5′-AgAgggATACAAACTgATggAAACA-3 ′, ABS TM 6FAM-CTAGTAGTAGTGGT -q). Условия циклирования были следующими: предварительная денатурация (95 ° C в течение 10 минут), 45 циклов амплификации (95 ° C в течение 30 с, 61 ° C в течение 30 с, 72 ° C в течение 30 с) и окончательное удлинение (72 ° C для 10 минут).

После скрининга всех 55 летучих мышей из Германии 12 видов, включающих дополнительные 11 общих пипистреллов, идентичный аденовирус был обнаружен в 1 дополнительной общей пипистрелле. Кроме того, тканевой тропизм летучих мышей AdV-2 был исследован у всех 3 зараженных летучих мышей (). Из всех тестируемых органов у летучих мышей AdV-2 был обнаружен в больших количествах копий ДНК в кишечнике у всех трех летучих мышей с меньшим числом копий ДНК в печени и почках, тогда как в других органах ДНК аденовируса была незначительной или отсутствовала. К сожалению, из-за прогрессирующего разложения тканей в большинстве органов, включая печень, почки и кишечник, тщательное гистопатологическое исследование 3 летучих мышей было заметно нарушено.

Таблица 2

Распределение количества копий ДНК летучей мыши AdV-2 в различных органах одинакового размера у зараженных летучих мышей Pipistrellus pipistrellus , Германия * †

Летучая мышь № Кишечник Печень Почка Легкое Сердце Мозг Селезенка 198/07 +++++ +++ ++++ + - - ND 199/07 ++++++ ++++ +++ + + - ND 200/07 + ++++++ +++ ++ + - - ++

Выводы

В отличие от Maeda et al. ( 12 ), который постулировал необходимость первичных клеток летучей мыши для выделения вируса ДНК из рукокрылых, наша изоляция ДНК-вируса от европейской летучей мыши в постоянной клеточной линии (клетки почек обезьяны) доказала обратное. Мы полагаем, что редкое обнаружение и выделение вирусов может быть связано с быстрой естественной деградацией летучих мышей подотряда Microchiroptera по сравнению с таковой у других туш животных, скорее всего из-за их чрезвычайно низкого веса (2–10 г). Хотя вирусы не были обнаружены с помощью различных общих анализов ПЦР из гомогенизированных образцов замороженной ткани, мы выделили новый вирус из гибернации насекомоядных видов летучих мышей. Этот вирус был обнаружен в большом количестве копий ДНК в кишечнике 3 летучих мышей, которые умерли по естественным причинам.

Тот факт, что у этих животных не было обнаружено других вирусных или бактериальных агентов, указывает на клиническую корреляцию с выделенным аденовирусом. Более того, все 3 летучих мыши принадлежали к одному виду и были одинакового возраста. За несколько дней до их смерти они были найдены умирающими и впоследствии помещены вместе в реабилитационный центр, что указывает на высокую вероятность заражения в колонии происхождения. Перекрестное загрязнение во время подготовки ткани может быть исключено, потому что стерилизованные инструменты использовались для каждого животного, и после каждого разреза инструменты очищались с помощью 70% этанола и пламени горелки Бунзена для уничтожения прилипших остатков ткани.

Различные типы аденовирусов рода Mastdenovirus заражают целый ряд различных млекопитающих и вызывают респираторные, глазные и желудочно-кишечные заболевания. Здесь, у всех 3 инфицированных летучих мышей, наибольшее количество копий аденовирусной ДНК было обнаружено в кишечнике, что указывает на корреляцию с желудочно-кишечным заболеванием. Известно, что спектр хозяев мастаденовирусов ограничен одним (или несколькими близкородственными) видами млекопитающих ( 13 ) с вероятной коэволюцией между вирусом и его хозяевами ( 14 ). Полученная частичная последовательность ДНК-полимеразы летучих мышей AdV-2, наиболее близкая к аденовирусу собак (всего 74% на уровне нуклеиновых кислот), и выделение из нового животного-хозяина позволяет предположить, что этот вирус является новым видом аденовирусов в составе рода Mastadenovirus. , Сравнение с единственным другим аденовирусом, обнаруженным у летучей мыши (летучая лисица, отряд Megachiroptera), с доступной информацией о последовательности фрагмента гена ДНК-полимеразы в ≈550 п.н. показало их отдаленную связь. Это строгое разделение отражает либо коэволюционное развитие между 2 аденовирусами (bat AdV-1 FBV1, bat AdV-2 PPV1) и их семействами-хозяевами Pteropodidae и Vespertilionidae, либо переключением хозяина вируса, происходящего от еще не определенного хозяина позвоночных. Чтобы выяснить эту проблему, необходимы дальнейшие исследования.

В заключение, мы выделили новый вирус из летучих мышей со свободным везением, который представляет собой единственный изолят вируса хироптеран, кроме лиссавируса (бешенства), найденного в Европе. Кроме того, обнаружение этого вируса хироптеран может быть связано с его передачей между отдельными летучими мышами, живущими в непосредственной близости от других летучих мышей.

Подтверждения

Мы благодарны протекционистам летучих мышей за сбор летучих мышей; Юнг-Вон Сим-Бранденбург, Юлия Теш и Анджелина Кус за отличную техническую помощь; Андреас Нитче за разработку анализа ПЦР в реальном времени для летучих мышей AdV-2; и Урсула Эрикли и Алан Карри за их преданную редакционную помощь.

биография

Г-н Соннтаг - студент магистратуры в Центре биологической безопасности, Институт Роберта Коха, Берлин. Его основной исследовательский интерес - изоляция и молекулярная характеристика патогенов человека и животных с особым акцентом на возникающие вирусные инфекции.

Сноски

Предлагаемая цитата для этой статьи : Sonntag M, Mühldorfer K, Speck S, Wibbelt G, Kurth A. Новый аденовирус у летучих мышей, Германия. Emerg Infect Dis [сериал в интернете]. 2009 декабрь [указанная дата ]. Доступна с http://www.cdc.gov/EID/content/15/12/2052.htm

Рекомендации

1. Wibbelt G, Speck S, Field H Методы оценки заболеваний у летучих мышей. В кн .: Кунц Т.Х., Парсонс С., редакторы. Экологические и поведенческие методы изучения летучих мышей. Балтимор (Мэриленд): издательство Университета Джонса Хопкинса; 2009. с. 775-794. [ Google ученый ] 2. Джонсон Н., Уэйкли П.Р., Брукс С.М., Фукс А.Р. Европейская летучая мышь-лисавирус типа 2 в Myotis daubentonii. Emerg Infect Dis. 2006; 12: 1142–4 [ PMC бесплатная статья ] [ PubMed ] [ Google ученый ] 3. Хэлпин К., Янг П.Л., Филд Х.Э., Макензи Дж.С. Выделение вируса Хендры из птеропидных летучих мышей: естественный резервуар вируса Хендры. J Gen Virol. 2000; 81: 1927–32 [ PubMed ] [ Google ученый ] 4. Чуа К.Б., Ко К.Л., Хой П.С., Ви К.Ф., Хонг Дж. Х., Чуа Б.Х. и др. Выделение вируса Нипах из лисиц острова Малайзии. Инфекция микробов. 2002; 4: 145–51 10.1016 / S1286-4579 (01) 01522-2 [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google ученый ] 5. Lau SK, Woo PC, Li KS, Huang Y, Tsoi HW, Wong BH, et al. Тяжелый острый респираторный синдром коронавирусоподобного вируса у китайских подковообразных летучих мышей. Proc Natl Acad Sci USA. 2005; 102: 14040–5 10,1073 / pnas.0506735102 [ PMC бесплатная статья ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google ученый ] 6. Calisher CH, Childs JE, Field HE, Holmes KV, Schountz T Bats: важные резервуары-хозяева новых вирусов. Clin Microbiol Rev. 2006; 19: 531–45 10.1128 / CMR.00017-06 [ PMC бесплатная статья ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google ученый ] 7. Wibbelt G, Kurth A, Yasmum N, Bannert M, Nagel S, Nitsche A, et al. Обнаружение герпесвирусов у летучих мышей. J Gen Virol. 2007; 88: 2651-5 10.1099 / vir.0.83045-0 [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google ученый ] 8. Gloza-Rausch F, Ipsen A, Seebens A, Göttsche M, Panning M, Drexler JF, et al. Выявление и распространенность коронавирусов I группы у летучих мышей, северная Германия. Emerg Infect Dis. 2008; 14: 626–31 10,3201 / eid1404.071439 [ PMC бесплатная статья ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google ученый ] 9. Linacre A, Lee JC. Определение видов: роль и использование гена цитохрома b. Методы Мол Биол. 2005; 297: 45–52 [ PubMed ] [ Google ученый ] 10. Веллехан Дж. Ф., Джонсон А. Дж., Харрач Б., Бенко М., Пессиер А. П., Джонсон С. М. и др. Обнаружение и анализ шести аденовирусов ящериц с помощью ПЦР с использованием консенсусного праймера является дополнительным доказательством происхождения рептилий для атаденовирусов. J Virol. 2004; 78: 13366–9 10.1128 / JVI.78.23.13366-13369.2004 [ PMC бесплатная статья ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google ученый ] 11. van der Hoek L, Pyrc K, Jebbink MF, Vermeulen-Oost W, Berkhout RJ, Wolthers KC, et al. Выявление нового коронавируса человека. Nat Med. 2004; 10: 368–73 10,1038 / нм1024 [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google ученый ] 12. Maeda K, Hondo E, Terakawa J, Kiso Y, Nakaichi N, Endoh D, et al. Выделение нового аденовируса из плодовой летучей мыши ( Pteropus dasymallus yayeyamae ). Emerg Infect Dis. 2008; 14: 347–9 10,3201 / eid1402.070932 [ PMC бесплатная статья ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google ученый ] 13. Schrenzel M, Oaks JL, Rotstein D, Maalouf G, Snook E, Sandfort C, et al. Характеристика нового вида аденовируса у соколов. J Clin Microbiol. 2005; 43: 3402–13 10.1128 / JCM.43.7.3402-3413.2005 [ PMC бесплатная статья ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google ученый ] 14. Харрах Б. Аденовирусы: общие черты. В: Mahy BW, van Regenmortel MH, редакторы. Энциклопедия вирусологии. Оксфорд: Elsevier; 2008. с. 1-9. [ Google ученый ] Статьи о возникающих инфекционных заболеваниях предоставлены здесь благодаря Центрам по контролю и профилактике заболеваний.

Похожие

Подбери свой макияж на Новый год!
Макияж определенно играет на первой скрипке. Пухлые губы, пленительный взгляд, идеально очерченное лицо? Как добиться идеального макияжа, который подчеркнет красоту, но дополнительно он впишется в наш наряд? марка Золотая Роза Думая о женщинах, ищущих новогоднее вдохновение, она подготовила последние тенденции в макияже. Проверьте, как выделиться и быть самой красивой! Выбор новогоднего творения вовсе не тривиальная задача. Выбирая новогоднее
Низкоэнергетический импульсный свет для удаления волос в домашних условиях
J Clin Aesthet Dermatol. 2010 февраль; 3 (2): 48–53. Майкл Х. Голд Медицинский директор, Gold Skin Care Center, Центр клинических исследований штата Теннесси, Нэшвилл, штат Теннесси; Ассистент Клинического Профессора, Медицинская Школа Университета Вандербильта, Нэшвилл, Теннесси; Приглашенный профессор, Университет Фудань (Шанхайский медицинский университет), Шанхай, Китай, Китайский медицинский университет, Шеньян, Китай Эми Фостер Центр клинических
Гестационный диабет
Гестационный диабет - это любое нарушение углеводного обмена, возникающее во время беременности. Важную диагностическую роль играет триместр беременности, в котором впервые выявлены нарушения толерантности к углеводам. Диагностика этих расстройств в начале беременности может указывать на наличие необнаруженного предиабета или диабета 1 или 2 типа даже до беременности.
Больница «Охматдет»: новый главный врач о планах и перспективах развития
Резюме. Один месяц работы на новом месте любого руководителя, конечно, короткий период для системного охвата ситуации. А если речь идет о большой многопрофильную учреждение на пороге реформирования - нечего и говорить. И все же, несмотря на дефицит времени и большой поток насущных задач, вновь главный врач Национальной детской специализированной больницы «Охматдет» Министерства здравоохранения (МЗ) Украины Ирина Садовьяк нашла возможность для короткого интервью.
Для просмотра полного текста, пожалуйста, войдите Для просмотра PDF, пожалуйста, войдите купить ...
Для просмотра полного текста, пожалуйста, войдите Для просмотра PDF, пожалуйста, войдите купить Полный текст и PDF Неограниченный повторный доступ через MyKarger Неограниченная печать, без сохранения ограничений для личного использования прочитайте больше 38 швейцарских франков * 35,00 евро * 39,00 долларов США *
Помощник Google также прибывает в Карты Google: вот новый менее инвазивный интерфейс
Объявленный во время ввода-вывода в 2018 году, Google Assistant на Картах Google является одним из тех небольших нововведений, способных революционизировать пользовательский интерфейс сервиса. Это реализация виртуального помощника в интерфейсе приложения карты, чтобы не прерывать спутниковую навигацию, когда пользователь просто хочет запросить голосовую информацию на своем устройстве во время вождения (или в другом обстоятельства, при которых Карты могут быть полезны).
Уровень содержания алкоголя в крови: таблица, калькулятор, нормы
Этанол выводится у людей с разной скоростью. В каждом случае скорость очистки организма индивидуальна, зависит от пола, состояния здоровья. Алкогольный калькулятор позволяет оценить среднестатистический, примерный уровень алкоголя в плазме крови, вычислить, когда водителю можно сесть за руль автомобиля. алкогольный калькулятор Концентрацию алкоголя, содержащегося в крови, вычисляют с помощью калькулятора, учитывающий крепость, объем выпитых напитков, пол и вес. Калькулятор
Аннотация Фон Streptococcus pyogenes ( S. pyogenes ) вызывает различные серьезные заболевания, включ...
Аннотация Фон Streptococcus pyogenes ( S. pyogenes ) вызывает различные серьезные заболевания, включая некротический фасциит и синдром стрептококкового токсического шока. Одной из серьезных проблем, наблюдаемых в последнее время при терапии S. pyogenes, является ослабление антибиотического эффекта, особенно неудачи лечения пенициллином и устойчивости к макролидам. Hainosankyuto, традиционная японская медицина, основанная на древней китайской медицине,
Оценка временных рядов национальной кампании по информированию о инсульте FAST в Англии
Вступление Инсульт является третьей по значимости причиной смерти в мире и основной причиной тяжелой инвалидности среди взрослых в развитых странах. [1] , [2] , При остром ишемическом инсульте быстрый тромболизис в течение 4,5 часов может улучшить прогноз с большей пользой от более раннего лечения [3] , [+4] , Оперативный ответ на
Клиническое влияние на заживление ран и воспаление во влажной, влажной и сухой среде
Область и значение В его обзоре освещаются клинические данные, касающиеся лечения ран во влажной или влажной среде. Кроме того, обсуждается возможная модуляция микросреды заживающей раны с некоторыми примерами текущих исследований, связанных с этой темой. Актуальность перевода Успешное лечение ран основывается на точном контроле и постоянном контроле процесса заживления ран. В этом обзоре обобщены последствия и последствия влажной или влажной обработки кожных
Руководство по профилактическим услугам для женщин
 20 декабря 2016 года HRSA обновила Рекомендации по профилактическим услугам для женщин при поддержке HRSA. Читайте самую последнюю версию , Неисполненные планы и покрытие (как правило, планы или политики, созданные или проданные после 23 марта 2010 года, или более старые планы или политики, которые были изменены определенным образом с этой даты) должны обеспечивать покрытие без распределения затрат
Пухлые губы, пленительный взгляд, идеально очерченное лицо?
Как добиться идеального макияжа, который подчеркнет красоту, но дополнительно он впишется в наш наряд?